Avaliação da migração das células progenitoras após terapia da tendinite equina / Migration evaluation of progenitor cells after treatment of equine tendinitis

A terapia celular vem sendo utilizada com resultados promissores no tratamento da tendinite equina, entretanto ainda existem dúvidas quanto à persistência e ao comportamento dessas células quando implantadas no local da lesão, e quanto à sua migração para outros focos inflamatórios. O objetivo deste estudo foi avaliar a marcação das células-tronco mesenquimais (CTMs) com nanocristal antes e após o implante em lesões tendíneas experimentais do tendão flexor digital superficial (TFDS) de equinos, bem como observar a possibilidade de migração das CTMs marcadas para outro foco de lesão, o membro contralateral do mesmo animal. Para isso, foi realizada a indução de lesão experimental no TFDS em ambos os membros torácicos de cinco equinos e, após sete dias, foram implantadas as CTMs autólogas marcadas com o nanocristal Qtracker 655 em um dos membros dos animais. Após sete dias do implante, foi realizada a biópsia tendínea para posterior avaliação histopatológica, utilizando-se microscopia com fluorescência. Também foi realizado o teste de viabilidade celular antes e após a incubação com o nanocristal. As CTMs marcadas e injetadas no tecido tendíneo mantiveram sua fluorescência sete dias após seu implante, e não ocorreu migração para o membro contralateral. O uso do nanocristal para a marcação das CTMs derivadas da medula óssea equina mostrou-se efetivo pelo fato de essa nanopartícula não ter alterado a viabilidade celular e por ela ter permanecido ativa durante o período implantado...

Cell therapy has been used with promising results in the treatment of equine tendinitis. However, there are still doubts about the persistence and behavior of these cells implanted in the injured tissue and their migration to other inflamed sites. The aim of this study was to evaluate the labeling of mesenchymal stem cells (MSCs) with nanocrystals before and after implantation in experimental tendinitis of the superficial digital flexor tendon (SDFT) of horses, observing the migration possibility of MSCs marked to another lesion, performed on the contralateral limb of the same animal. An experimental lesion was induced in SDFT in both forelimbs of five horses, and after seven days autologous MSCs labeled with Qtracker(r) 655 were implanted in one member of the animals. Tendon biopsy was performed for subsequent histopathological evaluation using fluorescence microscopy seven days after the implant. Cell viability test was also performed before and after incubation with the cell labeling kit. MSCs labeled and injected into the tendon tissue maintained their fluorescence seven days after their implantation and there was no migration to the contralateral limb. The use of nanocrystals for labeling MSCs was effective because it does not alter cell viability and remains active during the experimental period...

Characterization of mesenchymal stem cells derived from equine adipose tissue / Caracterização das células tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo equino

Stem cell therapy has shown promising results in tendinitis and osteoarthritis in equine medicine. The purpose of this work was to characterize the adipose-derived mesenchymal stem cells (AdMSCs) in horses through (1) the assessment of the capacity of progenitor cells to perform adipogenic, osteogenic and chondrogenic differentiation; and (2) flow cytometry analysis using the stemness related markers: CD44, CD90, CD105 and MHC Class II. Five mixed-breed horses, aged 2-4 years-old were used to collect adipose tissue from the base of the tail. After isolation and culture of AdMSCs, immunophenotypic characterization was performed through flow cytometry. There was a high expression of CD44, CD90 and CD105, and no expression of MHC Class II markers. The tri-lineage differentiation was confirmed by specific staining: adipogenic (Oil Red O), osteogenic (Alizarin Red), and chondrogenic (Alcian Blue). The equine AdMSCs are a promising type of adult progenitor cell for tissue engineering in veterinary medicine.

O uso de células tronco tem demonstrado resultados promissores na terapia da tendinite e osteoartrite na medicina equina. O objetivo deste trabalho foi caracterizar as células tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo (AdCTMs) em cavalos através da (1) avaliação da capacidade das células progenitoras para realizar a diferenciação adipogênica, osteogênica e condrogênica; e (2) através da análise por citometria de fluxo, utilizando os marcadores stemness relacionados: CD44, CD90, CD105 e MHC de Classe II. Cinco cavalos sem raça definida, de 2 a 4 anos de idade foram utilizados para a coleta do tecido adiposo da base da cauda. Após o isolamento e cultivo das AdCTMs, a caracterização imunofenotípica foi realizada pela citometria de fluxo. Houve alta expressão dos marcadores CD44, CD90 e CD105, e não houve expressão do MHC Classe II. A diferenciação foi confirmada pela coloração específica: adipogênica (Oil Red O), osteogênico (Alizarin Red), e condrogênico (Alcian Blue). As AdCTMs são um tipo promissor de células progenitoras adulta para a engenharia tecidual na medicina veterinária.

Utilização de contrairritante no tratamento da fixação dorsal de patela intermitente em equinos: relato de casos / The use of counterirritant in the treatment of upward fixation of intermittent patella in horses: case report

Em nove equinos atendidos por apresentarem fixação dorsal de patela intermitente, optou-se pela aplicação de 2mL de contrairritante na região subcutânea, ao longo dos ligamentos patelares medial e intermédio. No período de 12 a 48h após a aplicação, os animais apresentaram aumento de volume e de temperatura local, sensibilidade dolorosa à palpação e relutância à locomoção. Após esse período, os sinais clínicos de inflamação e fixação dorsal de patela foram gradativamente diminuindo até o sétimo dia, em sete dos nove animais avaliados. Após a remissão dos sinais de inflamação, dois animais não responderam ao tratamento, sendo necessária a repetição em um dos casos e realização de desmotomia patelar medial no outro. A aplicação de contrairritante foi eficaz na remissão do sinal clínico de fixação dorsal da patela intermitente. Comparativamente às técnicas cirúrgicas para a correção da enfermidade descritas na literatura, o tratamento promoveu melhora precoce dos sinais, curto período de convalescência e praticidade na realização.

Nine horses were admitted showing intermittent lameness due to upward fixation of the patella (UFP) and were injected with 2mL of counter-irritant subcutaneously, through the middle and medial patellar ligaments. From 12 to 48 hours after application, these animals showed increased volume and local temperature, painful response to palpation and reluctance to bear weight. Subsequently, the inflammatory signs were gradually decreasing until the seventh day, along with signs of UFP in seven of the nine animals. After remission of inflammatory signs, two of the nine horses did not respond to the treatment. In these two animals, one horse needed a repeated counter-irritant injection and the other received the medial patellar desmotomy. The use of counter-irritant was effective in the remission of clinical signs of UFP. In comparison with the surgical techniques described in literature used to correct this disease, the proposed treatment promoted early improvement of clinical signs, short term recovery and was easily performed.

Plasma rico em plaquetas no tratamento de lesões condrais articulares induzidas experimentalmente em equinos: avaliação clínica, macroscópica, histológica e histoquímica / Platelet-rich plasma in the treatment of articular chondral defects experimentally induced in horses: clinical, macroscopic, histopathological and histochemical evaluation

Estudou-se a eficácia do plasma rico em plaquetas (PRP) no tratamento de lesões condrais articulares, experimentalmente induzidas em equinos. Para isso, foi induzida uma lesão condral, na tróclea medial femoral dos dois membros pélvicos de quatro animais. Após 30 dias da indução, as oito articulações foram divididas em dois grupos. Os animais do grupo 1 receberam o tratamento intralesional e intra-articular com PRP, e os do grupo 2 foram tratados apenas com solução fisiológica. As avaliações clínicas, constituídas de exames de claudicação e análises do líquido sinovial, foram realizadas antes da indução da lesão - tempo zero -, quinzenalmente, até 120 dias e aos 150 dias. Avaliações macroscópicas, histológicas e histoquímicas foram realizadas no tempo zero e aos 150 dias. Os equinos do grupo 1 apresentaram melhora do grau de claudicação em relação aos do grupo 2. Os exames macroscópicos, histológicos e histoquímicos revelaram melhor tecido de reparação igualmente no grupo 1. Concluiu-se que a administração de PRP apresentou efeitos benéficos no tratamento de lesões condrais experimentais de equinos.

The use of platelet-rich plasma (PRP) in the treatment of articular cartilage defects induced experimentally in horses was studied. For this purpose, both patellofemoral joints of four animals were approached through arthroscopic surgery to perform a cartilage defect on the medial femoral trochlea. After 30 days of induction the eight joints were divided into two groups. Group 1 animals received intralesional and intra-articular treatment with PRP and Group 2 animals were treated only with saline solution. The clinical assessments, constituted by lameness signs and synovial fluid analysis, were performed before induction of injury (time zero) and every 15 days in 120 days, with last analysis on day 150. The macroscopic and morphologic analysis were performed at 0 and 150 days. During the experiment Group 1 animals showed improvement in lameness when compared to Group 2 animals. The macroscopic and morphological analysis showed a better tissue repair in the treated horses. Thus, the implantation of autologous PRP showed beneficial effects in the treatment of chondral lesions, experimentally induced in horses.

Plasma rico em plaquetas no tratamento de lesões condrais articulares induzidas experimentalmente em equinos: avaliação clínica, macroscópica, histológica e histoquímica / Platelet-rich plasma in the treatment of articular chondral defects experimentally induced in horses: clinical, macroscopic, histopathological and histochemical evaluation

Estudou-se a eficácia do plasma rico em plaquetas (PRP) no tratamento de lesões condrais articulares, experimentalmente induzidas em equinos. Para isso, foi induzida uma lesão condral, na tróclea medial femoral dos dois membros pélvicos de quatro animais. Após 30 dias da indução, as oito articulações foram divididas em dois grupos. Os animais do grupo 1 receberam o tratamento intralesional e intra-articular com PRP, e os do grupo 2 foram tratados apenas com solução fisiológica. As avaliações clínicas, constituídas de exames de claudicação e análises do líquido sinovial, foram realizadas antes da indução da lesão - tempo zero -, quinzenalmente, até 120 dias e aos 150 dias. Avaliações macroscópicas, histológicas e histoquímicas foram realizadas no tempo zero e aos 150 dias. Os equinos do grupo 1 apresentaram melhora do grau de claudicação em relação aos do grupo 2. Os exames macroscópicos, histológicos e histoquímicos revelaram melhor tecido de reparação igualmente no grupo 1. Concluiu-se que a administração de PRP apresentou efeitos benéficos no tratamento de lesões condrais experimentais de equinos.

The use of platelet-rich plasma (PRP) in the treatment of articular cartilage defects induced experimentally in horses was studied. For this purpose, both patellofemoral joints of four animals were approached through arthroscopic surgery to perform a cartilage defect on the medial femoral trochlea. After 30 days of induction the eight joints were divided into two groups. Group 1 animals received intralesional and intra-articular treatment with PRP and Group 2 animals were treated only with saline solution. The clinical assessments, constituted by lameness signs and synovial fluid analysis, were performed before induction of injury (time zero) and every 15 days in 120 days, with last analysis on day 150. The macroscopic and morphologic analysis were performed at 0 and 150 days. During the experiment Group 1 animals showed improvement in lameness when compared to Group 2 animals. The macroscopic and morphological analysis showed a better tissue repair in the treated horses. Thus, the implantation of autologous PRP showed beneficial effects in the treatment of chondral lesions, experimentally induced in horses.

Células mononucleares da medula óssea no tratamento da ruptura total dos tendões flexores e ligamento suspensor do boleto em equino / Bone marrow mononuclear cells in the treatment of complete tear of flexor tendons and suspensory ligament in the horse

This paper describes the case of a horse treated in a Teaching Veterinary Hospital. The sutures of the flexor apparatus associated with cell therapy, the stem cell, provided a rapid response of repair compared to other cases treated in routine of the Hospital. The association of conventional treatments with the mononuclear fraction of bone marrow significantly contributed to the reduction of the hyperextension of the metatarsophalangeal joint. Ultrasound images showed rapid fill cell and decrease in inflammation.